НИСЛЯ МЕТОД

НИСЛЯ МЕТОД окраски (Nissl) применяется для нервных клеток. Предлагая его, Нисль выдвинул принцип, что микроскоп. картина структуры нервной клетки в ткани, взятой от определенным образом убитого животного, при определенной гист. обработке повторяется с известной закономерностью, и таким образом получаются сравнимые «эквивалентные картины» (Aquivalentbil-der). (Значение метода—см. Нервные клетки.) Основной «классический» метод Нисля: фиксация в 96°-ном алкоголе. Кусочки не должны быть слишком велики, но и не меньше 1 см³. Материал должен быть возможно свежий, взятый не позднее 18 часов после смерти. Количество алкоголя должно быть достаточно большое, и он должен быть несколько раз сменен. Длительность фиксации— не менее пяти дней.—П риготовле-ние срез о в: из кусочка острой бритвой вырезается пластинка толщиной не более 6—8 мм, площадь ее может быть до 2 см² и даже больше. Одна из больших поверхностей обсушивается фильтровальной бума-' гой, и этой стороной кусочек наклеивается на деревянный блок гумми-арабиком, который уплотняется погружением в 96°-ный алкоголь. Срезы приготовляются при возможно более косом направлении микротомного ножа, смачиваемого 70°-ным алкоголем.— Окраска: срезы, хорошо расправленные, переносятся шпателем или стеклянным крючком в часовое стекло с краской следующего состава: метиленовая синька Б (Methy-lenblau В)—3,75 г, скобленого венецианского мыла—1,75 г, дестилированной воды — 1 000 см³. Краска со срезами осторожно нагревается до появления пара. По охлаждении срезы переносятся тоже расправленные ., в смесь анилинов, масла (бесцветного, фирмы Hochst)—10 см³ и алкоголя 96°-ного— 90 см³. В ней срезы остаются, пока от них отходят облачка краски. Затем срезы переносятся на предметное стекло, слегка обсушиваются фильтровальной бумагой и обливаются каепутовым маслом, которое быстро сливается; избыток его удаляется фильтровальной бумагой. Далее срезы обмываются на стекле бензином и заключаются в насыщенный раствор канифоли в ксилоле; при накладывании покровного стекла препарат слегка подогревается. В наст, время применяются с хорошими результатами следующие м о д и ф и к а-ц и и. Для приготовления срезов можно препарат заключать в целлоидин. Для окраски употребляется 0,1%-ный раствор то-луидиновой синьки (Toluidinblau), тионина (Thionin) или крезилвиолета (Kresylechtvio-lett). При применении толуидиновой синьки препарат подогревают до появления пара. Можно работать и без нагревания. Ди-ференцировать можно в 96°-ном алкоголе с последующим -проведением через абсолютный алкоголь и ксилол. При сильном перекрашивании можно диференцировать спиртами более слабой концентрации (70, 80°). Раствор канифоли можно заменить обычным канадским бальзамом, также подогревая препарат для более быстрого его высыхания.—При хорошей окраске интенсивно окрашенные хроматин и хроматофильное вещество должны ясно выделяться на бесцветном фоне. Кусочки мозга, фиксирован- ные формалином и хромовыми смесями (Ценкер, Гелли, Орт, Ценкер-формол и пр.), не дают правильных картин. Поэтому для пат. гистологии пользоваться такими препаратами не рекомендуется. В некоторых случаях однако приходится использовать материал, фиксированный таким способом. В этом случае необходимо 1) длительное (дня 2) промывание в проточной воде; 2) длительная (по Spielmeyer'y, 2—3 месяца) обработка некрупных кусочков сначала 70°-иым, чютом 96°-ным алкоголем (для растворения фиксированных формалином липоидов); 3) заливка в целлоидин; срезы перед окраской оставляют в 70°-ном алкоголе на сутки в термостате при t° 37° (Spielmeyer). Недостаток окраски препаратов, фиксированных формалином,—нечистый фон и неравномерная ДИференЦИрОВКа.                 А. Рахманов.